新的基因?qū)懭爰夹g顯示出大DNA插入的前景
2021年12 月 14 日——一個國際團隊開發(fā)了一種新的基因?qū)懭爰夹g，稱為查找剪切轉(zhuǎn)移 (FiCAT)，能夠進行大量基因插入。該方法于 12 月 3日發(fā)表在Nature Communications上，在治療選擇很少的遺傳和腫瘤疾病患者中具有潛在的基因編輯和基因治療臨床應用。
對于某些病理性遺傳缺陷，需要能夠處理更大范圍的堿基缺失的基因編輯系統(tǒng)。以前發(fā)表的方法，如同源獨立的靶向整合和睡美人轉(zhuǎn)座酶都在正確的軌道上，但要么無法用于哺乳動物細胞，要么缺乏必要的精度要求。
“隨著新編輯工具的開發(fā)，人類基因組工程在過去十年取得了重大進展，但仍然存在技術差距，可以在幾乎沒有大小限制的情況下有效轉(zhuǎn)移治療基因，”研究主管 Marc Güell 博士說。位于西班牙巴塞羅那的龐培法布拉大學 (PFU) 在一份聲明中。
為了彌補這一差距，來自 PFU 的研究人員開發(fā)了一種基于工程化 Cas9-piggyBac 融合蛋白的高效且精確的可編程基因遞送技術，該技術能夠遞送小型和大型有效載荷。據(jù)研究人員稱，該系統(tǒng)結(jié)合了修飾的 CRISPR-Cas 蛋白和工程化的 piggyBac 轉(zhuǎn)座酶(切割和轉(zhuǎn)移模塊)。在系統(tǒng)中，Cas9 發(fā)現(xiàn)并標記基因組插入點，而 PiggyBac 轉(zhuǎn)座酶功能提供增加的目標整合和減少脫靶事件。(Nat Commun，2021 年 12 月 3 日)
為了評估 FiCAT 系統(tǒng)的性能，研究人員創(chuàng)建了一個敏感的報告系統(tǒng)，用于基于目標整合后熒光蛋白開放閱讀框的重建，用于靶向基因插入。
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